Zentrales Tierlaboratorium Transgene Einheit

Die Transgene Einheit bietet umfassende Dienstleistungen rund um die Herstellung und den Einsatz genetisch modifizierter Mausmodelle an.  Sie verfügt über vier Laborräume, in denen gentechnische Arbeiten bis maximal Sicherheitsstufe 2  durchgeführt werden können:  Ein molekularbiologisches Labor, ein Labor zur Kryokonservierung von Mausembryonen und -gameten, ein Labor für Zellkultur und PCR-Setup, sowie ein Mikroinjektionslabor.
In einem separaten Tierhaltungsbereich erfolgt in individuell belüfteten Käfigen die Hintergrundzucht für die Herstellung genetisch modifizierter Mausmodelle und die Expansion sanierter oder generierter Mauslinien. Ferner steht dort ein Operationsraum mit angeschlossener Quarantäne für den Embryotransfer zur Verfügung; ein weiterer Operationsraum mit angeschlossener Maushaltung kann von Wissenschaftlern für tierexperimentelle Tätigkeiten nach Absprache genutzt werden.
Leistungen

Beratung zu Herstellung und Einsatz genetisch modifizierter Mausmodelle.

• PCR-basierte Isolierung spezifischer Klone aus einer genomischen Phagenbibliothek aus DNA der embryonalen Stammzelllinie R1.
• Planung und Herstellung von Vektoren für Gene Targeting und klassische Transgenese.
• Bereitstellung primärer Mausembryofibroblasten (PMEF) zur Kultur embryonaler Stammzellen.
• Durchführung der embryonalen Stammzellkultur für klassische knockout oder knock-in Experimente, bzw. konditionale Mutagenese basierend auf dem Cre/loxP System.
• Durchführung von Gene Targeting Experimenten (Elektroporation, Isolierung von Klonen, DNA-Präparation und Restriktion, Agarose-Gelelektrophorese, Blots).
• Mikroinjektion von DNA in die Vorkerne befruchteter Oozyten (klassische Transgenese) bzw. von embryonalen Stammzellen in Blastozysten (Gene Targeting).
• Kryokonservierung und Rederivation von Embryonen und Gameten.
• Entwicklung und Durchführung PCR-basierter Genotypisierungsverfahren (auch für Punktmutanten).
• Beschleunigte Rückkreuzung auf C57BL/6 (andere Stämme auf Anfrage) mittels minisatellitenbasierter PCR.
• Vorhalten einiger Rekombinase-exprimierender Mauslinien für Cre/lox-Experimente.